以下是使用Cas9和特異性Cas9的幾種常見遺傳操作的簡要總結(jié)。但是，在提供如此廣泛的Cas9試劑時，如何選擇適合自己具體實驗的Cas9呢？這篇博文將幫助您熟悉通過Addgene資源庫提供的大量Cas9，并幫助您選擇適合您使用的cas 9試劑，CRISPRCas9知識儲備第一彈:CRISPRCAS 9集群dre gully Interspace DShortpolindromic重復(fù)性與DProteins 9相關(guān)CRISPRCAS 9系統(tǒng)最早在細(xì)菌和古細(xì)菌中觀察到，作為一種適應(yīng)性微生物免疫系統(tǒng)，對外來病毒和質(zhì)粒提供獲得性免疫；CRISPR基因座可以在40%的細(xì)菌和90%的古細(xì)菌中觀察到，細(xì)菌中可能存在不止一個基因座。

現(xiàn)在大多數(shù)人談病毒都認(rèn)為病毒對人有害。只會給人帶來不好的影響，甚至危及生命。但有些病毒對人類是友好的，比如綠膿桿菌噬菌體，可以治療燒傷病人的化膿性感染。許多病毒對人體有害，但也有許多病毒對人類有幫助。比如各種疫苗，其實都是提取的病毒。艾滋病、麻疹等。是的，吞噬細(xì)胞可以作為抗生素殺死一些耐藥菌，嗜酸菌對人體也有好處，可以幫助消化。

CRISPR/Cas9的出現(xiàn)，使得高效準(zhǔn)確的修改基因組變得更加容易。Cas9已經(jīng)被修改，使研究人員能夠敲除、激活、抑制甚至成像你最喜歡的基因。但是，在提供如此廣泛的Cas9試劑時，如何選擇適合自己具體實驗的Cas9呢？這篇博文將幫助您熟悉通過Addgene資源庫提供的大量Cas9，并幫助您選擇適合您使用的cas 9試劑。

你是想永久消除細(xì)胞類型或生物體中的基因嗎？要不要在不永久修改基因組的情況下，減少特定基因的表達(dá)？嘗試在特定點激活是否更有意義？在特定位置修改表觀基因組怎么樣？正如你所料，這個問題的答案將極大地影響你決定你的實驗需要哪種情況。以下是使用Cas9和特異性Cas9的幾種常見遺傳操作的簡要總結(jié)。* * * *敲除細(xì)胞或動物通過共表達(dá)特異于待靶向基因的gRNA和內(nèi)分泌酶Cas9而形成。

實驗流程:1。設(shè)計SGRNAs 2。構(gòu)建SGRNAs 9載體3。構(gòu)建SGRNAs 9穩(wěn)定轉(zhuǎn)化植株4。篩選細(xì)胞克隆并進(jìn)行qPCR驗證5。測序陽性克隆，并選擇純合細(xì)胞系以剔除6。篩選細(xì)胞單克隆測序?qū)嶒灢襟E:1 .設(shè)計SGRNAs，針對小鼠LIF基因座(Musmusculus，NM_)設(shè)計三種SGRNAs。進(jìn)行軟件分析以確保sgRNA沒有預(yù)測的脫靶結(jié)合位點。

Crisprcas 9 clustered regularly interspacedShortpolindromicRepetitive scriptassociated proteins 9 Crisprcas 9系統(tǒng)最早在細(xì)菌和古細(xì)菌中觀察到，作為一種適應(yīng)性微生物免疫系統(tǒng)，對外來病毒和質(zhì)粒提供獲得性免疫；CRISPR基因座可以在40%的細(xì)菌和90%的古細(xì)菌中觀察到，細(xì)菌中可能存在不止一個基因座。

AAV 細(xì)胞核